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饱和酚是分子生物学等实验的重要实验品,常用于样本中DNA的提取、RNA的提取等。
饱和酚在核酸纯化中有2种,一种为Tris饱和酚,故也称为碱性酚,另一种就是酸性酚,也就是水饱和酚(表1)。
表1 饱和酚参数
名称 | 别名 | pH | 外观 | 用途 |
水饱和酚 | 水平衡酚 | <5.0 | 无色分层溶液 | RNA提取 |
Tris饱和酚 | Tris平衡酚 | >7.8 | 黄色分层溶液 | DNA提取 |
试剂成分的作用:
(1)用于RNA提取时,则要制备酸性酚,也就是水饱和酚,因为在酸性条件下,RNA被分配于水相,而DNA在有机相,从而达到分离获得RNA的目的。水饱和酚同时能使蛋白质变性、沉淀,从核酸提取液中将蛋白质分离除去。
(2)用于DNA提取时,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出。 而Tris的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构。 同时,由于PH值大于7,在碱性环境中DNA处于水相,RNA处于有机相。从而分离上清,即可得到DNA。
核酸提取结果
经典提取方法,适用范围广,不受样本限制,不受吸附柱或磁珠吸附能力的影响。
提取效率高:专业技术质检团队检验
1%琼脂糖浓度的非变性琼脂糖凝胶电泳进行 RNA 品质检验。 样品与 6×loading Buffer 混匀,在 120 V电压下电泳。
OD260/280 | 浓度(ng/μL) | 试剂成分 | |
RNA提取 | 1.91-2.01 | 700-860 | 水饱和酚 |
DNA提取 | 1.81-1.89 | 150~340 | Tris平衡酚 |