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大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA试剂盒实验使用说明书
BS-3658 天津本生大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA试剂盒
大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA试剂盒的实验使用说明书主要包括以下内容:
1. 实验原理
该试剂盒采用双抗体夹心法测定标本中大鼠Klotho蛋白(Klotho)水平。通过纯化的大鼠Klotho蛋白抗体包被微孔板,形成固相抗体,依次加入Klotho蛋白和HRP标记的Klotho蛋白抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB显色,颜色深浅与样品中Klotho蛋白含量呈正相关。最后用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
2. 试剂盒组成
30倍浓缩洗涤液:20ml×1瓶
酶标试剂:6ml×1瓶
标准品:2瓶
稀释液:1×45mL
检测溶液A:1×120μL
检测溶液B:1×120μL
TMB底物:1×9mL
终止液:1×6mL
96孔板(预包被):1块
96孔板覆膜:2张
使用说明书:1份。
3. 样本处理及要求
血清:全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,1000×g离心20分钟,取上清,避免反复冻融。
血浆:使用EDTA或肝素抗凝,采集后30分钟内于2-8℃离心,取上清。
细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒。
组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎,离心后取上清。
4. 实验步骤
加样:标准品及样本各50μL,37℃孵育30分钟。
洗涤:洗板5次,加入酶标试剂50μL,37℃孵育30分钟。
显色:加入显色液A、B各50μL,37℃孵育15分钟。
终止:加入终止液50μL,立即用酶标仪在450nm波长下测定吸光度。
5. 注意事项
试剂盒需在2-8℃保存,开封后酶标板需密封保存于-20℃。
实验过程中需避免样本反复冻融,确保操作环境温度、湿度一致。
试剂盒有效期一般为6个月至12个月,具体以标签为准。
6. 适用范围
该试剂盒适用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中Klotho蛋白的含量。
以上内容综合了多个来源的实验使用说明书,确保实验操作的准确性和可靠性。