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大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒实验使用说明书如下:
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中的三碘甲状腺原氨酸(T3)含量。首先用纯化的大鼠T3抗体包被微孔板,形成固相抗体。随后依次加入待测样本中的T3和HRP标记的T3抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。洗涤后加入底物TMB显色,TMB在HRP酶的催化下转化为蓝色,并在酸的作用下转化为黄色。颜色的深浅与样品中的T3浓度呈正相关,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并利用标准曲线计算样品中T3的浓度。
BS-3457 大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒 96T/48T
试剂盒组成
30倍浓缩洗涤液:20ml×1瓶
酶标试剂:6ml×1瓶
酶标包被板:1块(96孔)
标准品(240ng/ml):1瓶
显色液A:1瓶
显色液B:1瓶
终止液:6ml×1瓶
说明书:1份。
实验步骤
样本准备:将大鼠血清或血浆样本离心后取上清液,避免溶血或脂血。
加样:依次向包被板孔中加入标准品、质控品和待测样本,每孔50μL。
孵育:37℃孵育30分钟,洗涤5次。
加酶标试剂:每孔加入50μL HRP标记的T3抗体,37℃孵育30分钟,洗涤5次。
显色:每孔加入50μL显色液A和50μL显色液B,避光反应15分钟。
终止反应:每孔加入50μL终止液,轻轻混匀。
测定:使用酶标仪在450nm波长下测定各孔OD值。
结果计算
绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制标准曲线。
计算样本浓度:根据样本OD值,从标准曲线中查得对应的T3浓度。
注意事项
试剂保存:未开封试剂盒保存于2-8℃,开封后酶标板需密封保存于-20℃。
操作规范:避免交叉污染,使用一次性吸头,洗涤。
样本处理:避免反复冻融样本,确保样本新鲜。
实验环境:保持实验室温度、湿度稳定,避免强光直射。
适用范围
本试剂盒适用于定量测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中的三碘甲状腺原氨酸(T3)含量,用于甲状腺功能相关研究。
技术参数
检测范围:4ng/ml-120ng/ml。
检测限:47.4pg/mL。
保质期:12个月。
以上为大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒的详细使用说明,实验操作需严格按照说明书进行,以确保结果的准确性和可靠性。