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大鼠山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒实验使用说明书主要包括实验原理、试剂盒内容、样本处理、实验步骤及注意事项等部分。
BS-8545 大鼠山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒 试剂盒厂家:天津本生
实验原理
大鼠山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒采用固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)。已知SDH浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将SDH和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用产生颜色。颜色的深浅和样品中SDH的浓度呈比例关系。
试剂盒内容:
试剂盒通常包含以下组件(以96孔配置为例):
96孔板(预包被)1块
96孔板覆膜若干
标准品及标准品稀释缓冲液
生物素标记的抗SDH抗体
亲和链酶素-HRP
洗涤缓冲液
底物A、B
终止液::
使用说明书1份12样本处理
血清或血浆样本应避免溶血、高血脂,悬浮物应离心去除。
样本应尽早检测,2-8℃保存不超过48小时;长时间保存需冷冻(-20℃或-80℃),避免反复冻融3。
实验步骤
洗涤液配置:用蒸馏水按一定比例稀释浓缩洗涤液。
标准品配制:按说明书要求对标准品进行稀释,制备不同浓度的标准品溶液。
加样:将标准品和样本加入微孔中,加入生物素化抗体工作液,温育并洗涤。
加酶:加入亲和素标记的HRP,再次温育并洗涤。
显色:加入底物A、B,避光反应,产生颜色。
终止:加入终止液,终止反应。
读数:用酶标仪在波长下测定吸光度,计算样品浓度。
注意事项
实验过程中需严格控制温育时间和温度。
洗涤步骤要,以去除未结合的试剂。
底物显色反应需在避光条件下进行。
样本稀释倍数需根据实际情况确定,必要时进行预实验。
以上信息仅供参考,具体实验步骤和注意事项应以试剂盒附带的使用说明书为准。