小鼠短链脂肪酸(SCFA)ELISA试剂盒实验使用说明书 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴！本生试剂盒

　　小鼠短链脂肪酸(SCFA)ELISA试剂盒实验使用说明书‌

　　(基于试剂盒通用操作流程整理，供参考)

　　‌一、试剂盒基本信息‌

　　‌检测目标‌：小鼠粪便、血清或组织样本中的短链脂肪酸(如乙酸、丙酸、丁酸等)。

　　‌检测原理‌：基于竞争性ELISA法，通过特异性抗体结合SCFA，显色后通过OD值定量。

　　‌适用样本‌：血清、粪便悬液、肠道内容物或组织匀浆液。

　　‌二、试剂盒组成‌

　　组分数量保存条件

　　SCFA标准品(冻干粉)1瓶-20℃(溶解后4℃保存)

　　预包被微孔板96孔4℃

　　酶标试剂(HRP)1瓶4℃(避光)

　　显色液A/B各1瓶4℃(避光)

　　终止液1瓶室温

　　样本稀释液1瓶4℃

　　‌三、实验步骤‌

　　‌1. 样本前处理‌

　　‌粪便/肠道内容物‌：取50-100mg样本，加入1mL PBS匀浆，离心(3000rpm，10min)，取上清备用。

　　‌血清‌：直接使用，避免反复冻融。

　　‌组织‌：按1:9比例(重量/体积)加入PBS匀浆，离心后取上清。

　　‌2. 标准品稀释‌

　　用样本稀释液将冻干标准品复溶，梯度稀释为6个浓度(如：0、5、10、20、50、100 μmol/L)。

　　‌3. 检测流程‌

　　‌加样‌：

　　标准品孔：每孔50μL标准品。

　　样本孔：每孔50μL待测样本。

　　空白孔：50μL样本稀释液。

　　‌加酶标试剂‌：每孔加入50μL酶标试剂(空白孔除外)，37℃孵育30min。

　　‌洗板‌：甩干液体，每孔加满洗涤液，静置30s后弃去，重复5次。

　　‌显色‌：每孔依次加入显色液A/B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　‌终止‌：每孔加入50μL终止液，立即测定OD450nm值。

　　‌四、数据分析‌

　　‌标准曲线‌：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制曲线(推荐四参数拟合)。

　　‌样本计算‌：根据标准曲线方程，计算样本中SCFA浓度(需乘以稀释倍数)。

　　‌五、注意事项‌

　　‌关键步骤‌：

　　洗板后需拍干，避免残留液体影响OD值。

　　显色时间需严格控制，避免过度反应。

　　‌样本要求‌：

　　避免使用溶血或脂血样本。

　　粪便样本建议新鲜采集或-80℃保存。

　　‌试剂保存‌：

　　未开封试剂盒-20℃保存，开封后按组分要求保存。

　　‌说明‌：以上内容基于通用ELISA操作整理，具体操作请以试剂盒配套说明书为准。