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知识分享:胎牛血清冻存、融化相关事宜
胎牛血清冻存和融化的注意事项主要包括储存温度、解冻方法、避免反复冻融、处理絮状沉淀、分装建议以及避免光照。
储存温度:未拆封的胎牛血清应储存在-10℃至-20℃的温度下。若没有理想的储存条件,也可暂时于4℃冰箱中存储,但不建议长期存放,因为实验表明,一个月后营养成分会开始下降。同时,胎牛血清也不建议存放于-80℃,因为温度过低,瓶子容易发生破裂,导致血清污染。
解冻方法:建议按照逐步解冻法进行解冻,即从-20℃至4℃至室温。首先将其置于2℃至8℃的冰箱中融解,然后在室温下使其融化。在整个解冻过程中必须规则地摇晃均匀,以确保血清的稳定性。若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),非常容易产生沉淀物。请勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
避免反复冻融:血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。
处理絮状沉淀:若血清溶解后发现已经产生絮状物沉淀,建议去除沉淀方法可采用400g/1-2分钟离心或简单的将其沉淀在瓶子底部,将血清小心地转移至一个无菌瓶里。不建议采用过滤方式去除。
分装建议:融解后的胎牛血清应尽快使用。若一次无法使用完一瓶血清,建议无菌分装至合适大小的无菌离心管内,并放回-20℃冷冻保存。
避免光照:胎牛血清容器应避免直接暴露于光线中,因为光照可能会降解其中的成分。
遵循这些注意事项可以最大限度地保持胎牛血清的质量和生物活性,确保实验结果的准确性。
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