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人原钙黏素ELISA试剂盒洗板及实验细节
由于“人原钙黏素ELISA试剂盒"具有的特异性,抗原抗体的结合发生在抗原的决定簇与抗体的结合位点之间。那么人原钙黏素ELISA试剂盒洗板方法有以下两点。
1. 手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2. 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等
人原钙黏素ELISA试剂盒的样品采集方法,是收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
实验科研者们往往对结果最为关注,而因此忽略了细节问题,但结果取决于细节!
根据采用的载体分为:
1.疏水性聚脂布作为载体;
2.聚苯乙烯微量板为载体;
3.纤维膜为载体。
ELISA是将酶催化的放大作用与特异性抗原抗体反应结合起来的一种微量分析技术。酶标记抗原或抗体以后,既不影响抗原抗体反应的特异性,也不改变酶本身的活性。因为ELISA试剂盒价格低廉且准确性搞、反应时间短等优点,所以适合大批量的检测,一般常常用于食品安全检测方面。
ELISA需要遵循的几个细节要点:
1.抗原或抗体能吸附于固相载体表面,并保持其免疫学活性;
2.抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;
3.酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,可根据已知浓度的抗原或抗体的颜色反应的深浅绘制标准曲线并依此计算出未知样品中抗体或抗原的浓度。
除了以上内容,在ELISA试剂盒细节中,稀释前、后的样品必须充分混匀,所有试剂在加样前也须摇匀,以保证试验的均一性。
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