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本生阐述——胎牛血清中的脂肪酸如何去除?
胎牛血清是常见的实验室培养基营养液,在大部分实验中是不需要对胎牛血清中的脂肪酸进行去除的,但是,在进行某些特殊细胞培养的时候为了保证实验的准确性,我们要对胎牛血清中的某些成分进行去除。
常见的脂肪酸去除,我们一般用以下方法:
1、溶解:取适量的牛血洁白蛋白提取物,溶解于10倍的蒸馏水中,溶解温度在23~27℃。用浓度为0.2N的HCl,调治PH至3~3.5。
2、分析:充实溶解后的溶液牛血洁白蛋白移至冰水殽杂物中举行冰水浴,同时连续搅拌,维持30min。
3、吸附:参加5%的活性炭,混匀,将混悬液移至冰水殽杂物中举行冰水浴,同时连续搅拌,维持1小时。过滤,滤渣采取后再利用。
4、浓缩:滤液用0.2N的NaOH调治PH值至7.0,然后用20000分子量以下的超滤器举行超滤浓缩。
5、冻干:将浓缩液按冻干曲线冻干,即将超滤后的浓缩液敏捷冷冻至-40℃,连续1小时左右,升到-25℃,连续10~20小时,再迟钝升温至0℃,维持1~4小时,升温至生存温度20℃,分装为成品。
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