小鼠单抗 Ig 类/亚类鉴定用 ELISA 试剂盒使用说明书 天津本生

　　试剂原理:本试剂盒利用双抗体夹心法鉴定小鼠淋巴细胞杂交瘤培养上清中单克降抗体或特异亲和纯化的单克隆抗体的类和亚类(可区分出IgG1\IgG2aIgG2bIgG3IgMgA)采用小鼠抗体共有位点的二抗包被微孔板，与加入的培养上清中的小鼠抗体结合，再加入HRP标记的抗小鼠各类、亚类的抗体来分别反应，最后用 TMB 底物系统显色并用稀硫酸终止，再通过酶标仪检测吸光度来判断被测单克降抗体的类或亚类。本试剂盒具的分辨率，是您鉴定小鼠单克隆抗体类、亚类的可靠工具。

　　二、组成成分:

　　酶标板含自封袋2个2x96 孔

　　标本稀释液15m1通用阳性对照1.8ml

　　显色剂A15m1

　　通用阴性对照1.8ml

　　显色剂 B15m1

　　酶标二抗6种

　　6x4m1反应终止液

　　15m120x清洗液

　　50mL加样图2份

　　封板膜4 张说明书1份

　　三、使用范围:用于培养上清中小鼠单克隆抗体Ig类、亚类的鉴定以及相关内容的研究。

　　四、使用方法:

　　1、首先将试剂盒恢复室温(大约 30分)，然后用纯水把清洗液配成工作浓度(一份浓缩清洗液加 19 份纯水 )。

　　2、取出酶标板。每个标本需要6孔，阳性对照6孔，阴性对照6孔。多余的用自封袋保存，记得放入干燥剂。

　　3、将标本检测孔每孔先加入标本稀释液各 5041。然后将5041细胞培养上清(或特异亲和纯化的抗体)再加入酶标微孔板，每个标本加6孔;阳性对照和明性对照孔不加标本稀释液也是各加 6孔每孔 10041。贴上封板膜 37℃温育30分钟。

　　4、弃去板内液体，洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。再在每个标本的6孔中分别加入6种酶标二抗各 100%1，通用阳性、阴性对照的各孔也一样。在加样图上或酶标板上做好标记。贴上封板膜 37℃温育30分钟。

　　5、吸弃板内液体，洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。每孔分别加入显色剂A和显色剂B各 5041，换一张新的封板膜贴板避光 37℃显色 20分钟。

　　6、本试剂盒特异性好一般肉眼即可观察出结果，看显色蓝的那个孔所对应的酶标二抗就知道此标本的Ig类或亚类。更可将反应终止液(每孔5041)终止反应后用酶标仪450mm测定波长，630mm参考波长双波长测定结果，参看高值孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 Ig类或亚类(阳性对照0D一般不小于 0.8，阴性对照一般不高于0.15，阳性判定标准:样品 OD 大于阴性0D10.15，阴性0D低于0.05按0.05算)。

　　五、产品特点:高灵敏度、高特异性、结果容易判定。