一、负压法
1、正确连接负压装置,将96孔DNA制备板放置在负压装置上;向PCR、酶消化、酶标记或测序反应溶液中加入3倍的PCR-A缓冲液μl。加入100μl);充分混合并转移至96孔DNA制备板,打开并将负压调节至-25-30英寸汞柱,然后慢慢吸出板中的溶液。
2、加入0.3ml缓冲液W2并吸收溶液。使用相同的方法用0.3ml缓冲液W2洗涤两次。确认将无水乙醇添加到试剂瓶上规定体积的缓冲液W3浓缩液中。
3、保持负压,提取96孔DNA制备板10分钟。
4、将96孔DNA制备板在长纤维组织中粉碎6次,引流管向下。
5、将96孔DNA制备板置于96孔V形板上,加入25-30ul水或洗脱至膜中心,并在室温下静置1分钟。通过3000×G离心5分钟以洗脱DNA。
二、离心法
1、在PCR、消化、酶标记或测序反应中添加3倍体积的缓冲液PCR-A(如果缓冲液PCR-A小于100μl加100μl);混合并转移至制备板96孔中的96孔DNA。将DNA制备板放入96孔1.6ml深孔板×G离心器中1分钟,并丢弃滤液。
2、将0.3ml缓冲溶液W2加入96孔DNA制备板×G离心1分钟,并丢弃滤液。用0.3ml缓冲液W2以同样的方法再次洗涤。确认无水乙醇添加到试剂瓶上规定体积的缓冲液W1浓缩液中。
3、将96孔DNA制备板放入96孔1.6ml深孔板×G离心机中10分钟。
4、将96孔DNA制备板置于干净的96孔V形基板中,加入25-30ul水或洗脱至膜中心,并在室温下放置1分钟。通过3000×G离心5分钟以洗脱DNA。